એડીસ એજીપ્તી (ડિપ્ટેરા: કુલીસીડે) સામે લાર્વિસાઈડલ અને પુખ્ત વયના લોકો માટે ઉપાય તરીકે વનસ્પતિ આવશ્યક તેલ પર આધારિત ટેર્પીન સંયોજનોનું મિશ્રણ.

Nature.com ની મુલાકાત લેવા બદલ આભાર. તમે જે બ્રાઉઝરનો ઉપયોગ કરી રહ્યા છો તેના વર્ઝનમાં મર્યાદિત CSS સપોર્ટ છે. શ્રેષ્ઠ પરિણામો માટે, અમે ભલામણ કરીએ છીએ કે તમે તમારા બ્રાઉઝરના નવા વર્ઝનનો ઉપયોગ કરો (અથવા ઇન્ટરનેટ એક્સપ્લોરરમાં સુસંગતતા મોડને અક્ષમ કરો). આ દરમિયાન, ચાલુ સપોર્ટ સુનિશ્ચિત કરવા માટે, અમે સ્ટાઇલિંગ અથવા JavaScript વિના સાઇટ બતાવી રહ્યા છીએ.
છોડમાંથી મેળવેલા જંતુનાશક સંયોજનોના સંયોજનો જીવાતો સામે સિનર્જિસ્ટિક અથવા વિરોધી ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ પ્રદર્શિત કરી શકે છે. એડીસ મચ્છરો દ્વારા થતા રોગોના ઝડપી ફેલાવા અને પરંપરાગત જંતુનાશકો સામે એડીસ મચ્છરોની વસ્તીના વધતા પ્રતિકારને ધ્યાનમાં રાખીને, એડીસ એજીપ્ટીના લાર્વા અને પુખ્ત તબક્કાઓ સામે છોડના આવશ્યક તેલ પર આધારિત ટેર્પીન સંયોજનોના અઠ્ઠાવીસ સંયોજનો તૈયાર કરવામાં આવ્યા હતા અને તેનું પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. શરૂઆતમાં પાંચ છોડના આવશ્યક તેલ (EOs)નું તેમના લાર્વા અને પુખ્ત વયના લોકો માટે ઉપયોગની અસરકારકતા માટે મૂલ્યાંકન કરવામાં આવ્યું હતું, અને GC-MS પરિણામોના આધારે દરેક EO માં બે મુખ્ય સંયોજનો ઓળખવામાં આવ્યા હતા. મુખ્ય ઓળખાયેલા સંયોજનો ખરીદવામાં આવ્યા હતા, જેમ કે ડાયલીલ ડાયસલ્ફાઇડ, ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ, કાર્વોન, લિમોનીન, યુજેનોલ, મિથાઈલ યુજેનોલ, યુકેલિપ્ટોલ, યુડેસ્મોલ અને મચ્છર આલ્ફા-પિનેન. આ સંયોજનોના દ્વિસંગી સંયોજનો પછી સબલેથલ ડોઝનો ઉપયોગ કરીને તૈયાર કરવામાં આવ્યા હતા અને તેમની સિનર્જિસ્ટિક અને વિરોધી અસરોનું પરીક્ષણ અને નિર્ધારિત કરવામાં આવ્યું હતું. શ્રેષ્ઠ લાર્વિસાઇડલ રચનાઓ લિમોનેન ડાયાલિલ ડાયસલ્ફાઇડ સાથે ભેળવીને મેળવવામાં આવે છે, અને શ્રેષ્ઠ પુખ્ત રચનાઓ કાર્વોનને લિમોનેન સાથે ભેળવીને મેળવવામાં આવે છે. વ્યાપારી રીતે ઉપયોગમાં લેવાતા કૃત્રિમ લાર્વિસાઇડલ ટેમ્ફોસ અને પુખ્ત વયના લોકો માટે દવા મેલાથિઓનનું અલગથી અને ટેર્પેનોઇડ્સ સાથે દ્વિસંગી સંયોજનોમાં પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. પરિણામો દર્શાવે છે કે ટેમેફોસ અને ડાયાલિલ ડાયસલ્ફાઇડ અને મેલાથિઓન અને યુડેસ્મોલનું સંયોજન સૌથી અસરકારક હતું. આ શક્તિશાળી સંયોજનો એડીસ એજીપ્ટી સામે ઉપયોગ માટે સંભવિતતા ધરાવે છે.
વનસ્પતિ આવશ્યક તેલ (EOs) એ વિવિધ બાયોએક્ટિવ સંયોજનો ધરાવતા ગૌણ ચયાપચય છે અને કૃત્રિમ જંતુનાશકોના વિકલ્પ તરીકે વધુને વધુ મહત્વપૂર્ણ બની રહ્યા છે. તે પર્યાવરણને અનુકૂળ અને વપરાશકર્તા-મૈત્રીપૂર્ણ છે એટલું જ નહીં, પરંતુ તે વિવિધ બાયોએક્ટિવ સંયોજનોનું મિશ્રણ પણ છે, જે દવા પ્રતિકાર વિકસાવવાની શક્યતા પણ ઘટાડે છે1. GC-MS ટેકનોલોજીનો ઉપયોગ કરીને, સંશોધકોએ વિવિધ વનસ્પતિ આવશ્યક તેલના ઘટકોની તપાસ કરી અને 17,500 સુગંધિત છોડમાંથી 3,000 થી વધુ સંયોજનો ઓળખ્યા, જેમાંથી મોટાભાગના જંતુનાશક ગુણધર્મો માટે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યા હતા અને તેમાં જંતુનાશક અસરો હોવાનું નોંધાયું છે3,4. કેટલાક અભ્યાસો દર્શાવે છે કે સંયોજનના મુખ્ય ઘટકની ઝેરીતા તેના ક્રૂડ ઇથિલિન ઓક્સાઇડ જેટલી જ અથવા તેનાથી વધુ છે. પરંતુ વ્યક્તિગત સંયોજનોનો ઉપયોગ ફરીથી પ્રતિકારના વિકાસ માટે જગ્યા છોડી શકે છે, જેમ કે રાસાયણિક જંતુનાશકો5,6 ના કિસ્સામાં છે. તેથી, વર્તમાન ધ્યાન જંતુનાશક અસરકારકતા સુધારવા અને લક્ષ્ય જંતુઓની વસ્તીમાં પ્રતિકારની સંભાવના ઘટાડવા માટે ઇથિલિન ઓક્સાઇડ-આધારિત સંયોજનોના મિશ્રણ તૈયાર કરવા પર છે. EOs માં હાજર વ્યક્તિગત સક્રિય સંયોજનો EO ની એકંદર પ્રવૃત્તિને પ્રતિબિંબિત કરતી સંયોજનોમાં સિનર્જિસ્ટિક અથવા વિરોધી અસરો પ્રદર્શિત કરી શકે છે, આ હકીકત પર અગાઉના સંશોધકો દ્વારા હાથ ધરવામાં આવેલા અભ્યાસોમાં સારી રીતે ભાર મૂકવામાં આવ્યો છે7,8. વેક્ટર નિયંત્રણ કાર્યક્રમમાં EO અને તેના ઘટકોનો પણ સમાવેશ થાય છે. આવશ્યક તેલની મચ્છરઘાતક પ્રવૃત્તિનો ક્યુલેક્સ અને એનોફિલિસ મચ્છરો પર વ્યાપકપણે અભ્યાસ કરવામાં આવ્યો છે. ઘણા અભ્યાસોએ વિવિધ છોડને વ્યાપારી રીતે ઉપયોગમાં લેવાતા કૃત્રિમ જંતુનાશકો સાથે જોડીને અસરકારક જંતુનાશકો વિકસાવવાનો પ્રયાસ કર્યો છે જેથી એકંદર ઝેરીતા વધે અને આડઅસરો ઓછી થાય. પરંતુ એડીસ એજીપ્તી સામે આવા સંયોજનોના અભ્યાસ દુર્લભ રહ્યા છે. તબીબી વિજ્ઞાનમાં પ્રગતિ અને દવાઓ અને રસીઓના વિકાસથી કેટલાક વેક્ટર-જન્ય રોગો સામે લડવામાં મદદ મળી છે. પરંતુ એડીસ એજીપ્તી મચ્છર દ્વારા પ્રસારિત વાયરસના વિવિધ સેરોટાઇપ્સની હાજરી, રસીકરણ કાર્યક્રમોની નિષ્ફળતા તરફ દોરી ગઈ છે. તેથી, જ્યારે આવા રોગો થાય છે, ત્યારે વેક્ટર નિયંત્રણ કાર્યક્રમો રોગના ફેલાવાને રોકવા માટે એકમાત્ર વિકલ્પ છે. હાલના સંજોગોમાં, એડીસ એજીપ્તીનું નિયંત્રણ ખૂબ જ મહત્વપૂર્ણ છે કારણ કે તે વિવિધ વાયરસ અને તેમના સેરોટાઇપ્સનું મુખ્ય વાહક છે જે ડેન્ગ્યુ તાવ, ઝીકા, ડેન્ગ્યુ હેમોરહેજિક તાવ, પીળો તાવ, વગેરેનું કારણ બને છે. સૌથી નોંધપાત્ર બાબત એ છે કે ઇજિપ્તમાં દર વર્ષે અને વિશ્વભરમાં લગભગ તમામ વેક્ટર-જન્ય એડીસ-જન્ય રોગોના કેસોની સંખ્યા વધી રહી છે. તેથી, આ સંદર્ભમાં, એડીસ એજીપ્તીની વસ્તી માટે પર્યાવરણને અનુકૂળ અને અસરકારક નિયંત્રણ પગલાં વિકસાવવાની તાત્કાલિક જરૂર છે. આ સંદર્ભમાં સંભવિત ઉમેદવારો EOs, તેમના ઘટક સંયોજનો અને તેમના સંયોજનો છે. તેથી, આ અભ્યાસમાં એડીસ એજીપ્તી સામે જંતુનાશક ગુણધર્મો ધરાવતા પાંચ છોડ (જેમ કે, ફુદીનો, પવિત્ર તુલસી, નીલગિરી સ્પોટેડ, એલિયમ સલ્ફર અને મેલેલ્યુકા) માંથી મુખ્ય છોડ EO સંયોજનોના અસરકારક સિનર્જિસ્ટિક સંયોજનોને ઓળખવાનો પ્રયાસ કરવામાં આવ્યો છે.
બધા પસંદ કરેલા EO એ 0.42 થી 163.65 ppm સુધીના 24-h LC50 સાથે એડીસ એજીપ્ટી સામે સંભવિત લાર્વિસાઇડલ પ્રવૃત્તિ દર્શાવી. 24 કલાકે 0.42 ppm ના LC50 મૂલ્ય સાથે પેપરમિન્ટ (Mp) EO માટે સૌથી વધુ લાર્વિસાઇડલ પ્રવૃત્તિ નોંધાઈ હતી, ત્યારબાદ 24 કલાકે 16.19 ppm ના LC50 મૂલ્ય સાથે લસણ (As) નો ક્રમ આવે છે (કોષ્ટક 1).
ઓસીમમ સેન્ટમ, ઓએસ ઇઓના અપવાદ સિવાય, અન્ય ચાર સ્ક્રીન કરાયેલા ઇઓએ સ્પષ્ટ એલર્જીક અસરો દર્શાવી, જેમાં 24-કલાકના એક્સપોઝર સમયગાળા દરમિયાન LC50 મૂલ્યો 23.37 થી 120.16 પીપીએમ સુધી હતા. થાઇમોફિલસ સ્ટ્રાઇટા (Cl) ઇઓ એક્સપોઝરના 24 કલાકની અંદર 23.37 પીપીએમના LC50 મૂલ્ય સાથે પુખ્ત વયના લોકોને મારવામાં સૌથી અસરકારક હતું, ત્યારબાદ યુકેલિપ્ટસ મેક્યુલાટા (Em) આવે છે જેનો LC50 મૂલ્ય 101.91 પીપીએમ હતો (કોષ્ટક 1). બીજી બાજુ, ઓએસ માટે LC50 મૂલ્ય હજુ સુધી નક્કી કરવામાં આવ્યું નથી કારણ કે સૌથી વધુ માત્રા પર 53% નો સૌથી વધુ મૃત્યુ દર નોંધવામાં આવ્યો હતો (પૂરક આકૃતિ 3).
દરેક EO માં બે મુખ્ય ઘટક સંયોજનો ઓળખવામાં આવ્યા હતા અને NIST લાઇબ્રેરી ડેટાબેઝ પરિણામો, GC ક્રોમેટોગ્રામ ક્ષેત્ર ટકાવારી અને MS સ્પેક્ટ્રા પરિણામો (કોષ્ટક 2) ના આધારે પસંદ કરવામાં આવ્યા હતા. EO As માટે, ઓળખાયેલા મુખ્ય સંયોજનો ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ અને ડાયલિલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ હતા; EO Mp માટે ઓળખાયેલા મુખ્ય સંયોજનો કાર્વોન અને લિમોનીન હતા, EO Em માટે ઓળખાયેલા મુખ્ય સંયોજનો યુડેસ્મોલ અને યુકેલિપ્ટોલ હતા; EO Os માટે, ઓળખાયેલા મુખ્ય સંયોજનો યુજેનોલ અને મિથાઈલ યુજેનોલ હતા, અને EO Cl માટે, ઓળખાયેલા મુખ્ય સંયોજનો યુજેનોલ અને α-પિનેન હતા (આકૃતિ 1, પૂરક આકૃતિઓ 5-8, પૂરક કોષ્ટક 1-5).
પસંદ કરેલા આવશ્યક તેલ (A-ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ; B-ડાયલિલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ; C-યુજેનોલ; D-મિથાઈલ યુજેનોલ; E-લિમોનેન; F-એરોમેટિક સેપેરોન; G-α-પિનેન; H-સિનેઓલ; R-યુડામોલ) ના મુખ્ય ટેર્પેનોઇડ્સની માસ સ્પેક્ટ્રોમેટ્રીના પરિણામો.
કુલ નવ સંયોજનો (ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ, ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ, યુજેનોલ, મિથાઈલ યુજેનોલ, કાર્વોન, લિમોનીન, યુકેલિપ્ટોલ, યુડેસ્મોલ, α-પિનેન) ને અસરકારક સંયોજનો તરીકે ઓળખવામાં આવ્યા હતા જે EO ના મુખ્ય ઘટકો છે અને લાર્વા તબક્કામાં એડીસ એજીપ્ટી સામે વ્યક્તિગત રીતે જૈવ પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. 24 કલાકના સંપર્ક પછી યુડેસ્મોલ સંયોજનમાં સૌથી વધુ લાર્વાસાઈડલ પ્રવૃત્તિ હતી જેનું LC50 મૂલ્ય 2.25 ppm હતું. ડાયલીલ ડાયસલ્ફાઇડ અને ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ સંયોજનોમાં પણ સંભવિત લાર્વાસાઈડલ અસરો જોવા મળી છે, જેમાં સરેરાશ સબલેથલ ડોઝ 10-20 ppm ની રેન્જમાં છે. યુજેનોલ, લિમોનીન અને યુકેલિપ્ટોલ સંયોજનો માટે ફરીથી મધ્યમ લાર્વાસાઈડલ પ્રવૃત્તિ જોવા મળી હતી જેમાં LC50 મૂલ્ય 63.35 ppm, 139.29 ppm છે. અને 24 કલાક પછી અનુક્રમે 181.33 પીપીએમ (કોષ્ટક 3). જોકે, સૌથી વધુ માત્રામાં પણ મિથાઈલ યુજેનોલ અને કાર્વોનની કોઈ નોંધપાત્ર લાર્વિસાઇડલ ક્ષમતા મળી ન હતી, તેથી LC50 મૂલ્યોની ગણતરી કરવામાં આવી ન હતી (કોષ્ટક 3). કૃત્રિમ લાર્વિસાઇડ ટેમેફોસમાં 24 કલાકના સંપર્કમાં રહેવા દરમિયાન એડીસ એજીપ્ટી સામે સરેરાશ ઘાતક સાંદ્રતા 0.43 પીપીએમ હતી (કોષ્ટક 3, પૂરક કોષ્ટક 6).
અસરકારક EO ના મુખ્ય સંયોજનો તરીકે સાત સંયોજનો (ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ, ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ, યુકેલિપ્ટોલ, α-પિનેન, યુડેસ્મોલ, લિમોનીન અને કાર્વોન) ઓળખવામાં આવ્યા હતા અને પુખ્ત ઇજિપ્તીયન એડીસ મચ્છરો સામે વ્યક્તિગત રીતે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. પ્રોબિટ રીગ્રેશન વિશ્લેષણ મુજબ, 24-કલાકના સંપર્ક સમયે યુડેસ્મોલમાં LC50 મૂલ્ય 1.82 ppm સાથે સૌથી વધુ સંભાવના જોવા મળી હતી, ત્યારબાદ યુકેલિપ્ટોલ LC50 મૂલ્ય 17.60 ppm સાથે આવે છે. પરીક્ષણ કરાયેલા બાકીના પાંચ સંયોજનો LC50s ધરાવતા પુખ્ત વયના લોકો માટે 140.79 થી 737.01 ppm (કોષ્ટક 3) સુધીના મધ્યમ હાનિકારક હતા. કૃત્રિમ ઓર્ગેનોફોસ્ફરસ મેલાથિઓન યુડેસ્મોલ કરતા ઓછું શક્તિશાળી અને અન્ય છ સંયોજનો કરતા વધારે હતું, 24-કલાકના સંપર્ક સમયગાળા દરમિયાન LC50 મૂલ્ય 5.44 ppm સાથે (કોષ્ટક 3, પૂરક કોષ્ટક 6).
સાત શક્તિશાળી સીસા સંયોજનો અને ઓર્ગેનોફોસ્ફરસ ટેમેફોસેટને 1:1 ગુણોત્તરમાં તેમના LC50 ડોઝના દ્વિસંગી સંયોજનો બનાવવા માટે પસંદ કરવામાં આવ્યા હતા. કુલ 28 દ્વિસંગી સંયોજનો તૈયાર કરવામાં આવ્યા હતા અને એડીસ એજીપ્ટી સામે તેમની લાર્વિનાશક અસરકારકતા માટે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. નવ સંયોજનો સિનર્જિસ્ટિક હોવાનું જાણવા મળ્યું હતું, 14 સંયોજનો વિરોધી હતા, અને પાંચ સંયોજનો લાર્વિનાશક નહોતા. સિનર્જિસ્ટિક સંયોજનોમાં, ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ અને ટેમોફોલનું સંયોજન સૌથી અસરકારક હતું, જેમાં 24 કલાક પછી 100% મૃત્યુદર જોવા મળ્યો (કોષ્ટક 4). તેવી જ રીતે, ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ અને યુજેનોલ સાથે લિમોનીનના મિશ્રણોએ 98.3% ના અવલોકન કરાયેલ લાર્વા મૃત્યુદર સાથે સારી સંભાવના દર્શાવી હતી (કોષ્ટક 5). બાકીના 4 સંયોજનો, જેમ કે યુડેસ્મોલ વત્તા નીલગિરી, યુડેસ્મોલ વત્તા લિમોનીન, યુડેસ્મોલ વત્તા આલ્ફા-પીનેન, આલ્ફા-પીનેન વત્તા ટેમેફોસ, એ પણ નોંધપાત્ર લાર્વિસાઇડલ અસરકારકતા દર્શાવી, જેમાં મૃત્યુદર 90% થી વધુ જોવા મળ્યો. અપેક્ષિત મૃત્યુદર 60-75% ની નજીક છે. (કોષ્ટક 4). જોકે, α-પીનેન અથવા નીલગિરી સાથે લિમોનીનનું મિશ્રણ વિરોધી પ્રતિક્રિયાઓ દર્શાવે છે. તેવી જ રીતે, યુજેનોલ અથવા નીલગિરી અથવા યુડેસ્મોલ અથવા ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ સાથે ટેમેફોસના મિશ્રણમાં વિરોધી અસરો જોવા મળી છે. તેવી જ રીતે, ડાયલીલ ડાયસલ્ફાઇડ અને ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડનું મિશ્રણ અને યુડેસ્મોલ અથવા યુજેનોલ સાથે આ સંયોજનોમાંથી કોઈપણનું મિશ્રણ તેમની લાર્વિસાઇડલ ક્રિયામાં વિરોધી છે. યુજેનોલ અથવા α-પીનેન સાથે યુડેસ્મોલના મિશ્રણ સાથે પણ વિરોધીતા નોંધાઈ છે.
પુખ્ત વયના લોકોમાં એસિડિક પ્રવૃત્તિ માટે પરીક્ષણ કરાયેલા તમામ 28 દ્વિસંગી મિશ્રણોમાંથી, 7 સંયોજનો સિનર્જિસ્ટિક હતા, 6 પર કોઈ અસર થઈ ન હતી, અને 15 વિરોધી હતા. યુડેસ્મોલ અને લિમોનેન અને કાર્વોનનું મિશ્રણ અન્ય સિનર્જિસ્ટિક સંયોજનો કરતાં વધુ અસરકારક હોવાનું જણાયું હતું, જેમાં મૃત્યુદર 24 કલાકમાં અનુક્રમે 76% અને 100% હતો (કોષ્ટક 5). મેલાથિઓન લિમોનીન અને ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ સિવાયના તમામ સંયોજનો સાથે સિનર્જિસ્ટિક અસર દર્શાવતું જોવા મળ્યું છે. બીજી બાજુ, ડાયલીલ ડાયસલ્ફાઇડ અને ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ અને તેમાંથી કોઈપણના યુકેલિપ્ટોલ, અથવા કાર્વોન, અથવા લિમોનીન સાથેના સંયોજન વચ્ચે વિરોધાભાસ જોવા મળ્યો છે. તેવી જ રીતે, α-પિનેન યુડેસ્મોલ અથવા લિમોનીન સાથે, નીલગિરી કાર્વોન અથવા લિમોનીન સાથે, અને લિમોનેન યુડેસ્મોલ અથવા મેલાથિઓન સાથેના સંયોજનોએ વિરોધી લાર્વિસાઇડલ અસરો દર્શાવી હતી. બાકીના છ સંયોજનો માટે, અપેક્ષિત અને અવલોકન કરાયેલ મૃત્યુદર વચ્ચે કોઈ નોંધપાત્ર તફાવત નહોતો (કોષ્ટક 5).
સિનર્જિસ્ટિક ઇફેક્ટ્સ અને સબલેથલ ડોઝના આધારે, મોટી સંખ્યામાં એડીસ એજીપ્ટી મચ્છરો સામે તેમની લાર્વિસાઇડલ ઝેરી અસર આખરે પસંદ કરવામાં આવી હતી અને વધુ પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. પરિણામો દર્શાવે છે કે યુજેનોલ-લિમોનેન, ડાયલીલ ડાયસલ્ફાઇડ-લિમોનેન અને ડાયલીલ ડાયસલ્ફાઇડ-ટાઇમફોસ દ્વિસંગી સંયોજનોનો ઉપયોગ કરીને અવલોકન કરાયેલ લાર્વા મૃત્યુદર 100% હતો, જ્યારે અપેક્ષિત લાર્વા મૃત્યુદર અનુક્રમે 76.48%, 72.16% અને 63.4% હતો (કોષ્ટક 6). . લિમોનેન અને યુડેસ્મોલનું સંયોજન પ્રમાણમાં ઓછું અસરકારક હતું, 24-કલાકના સંપર્ક સમયગાળા દરમિયાન 88% લાર્વા મૃત્યુદર જોવા મળ્યો (કોષ્ટક 6). સારાંશમાં, ચાર પસંદ કરેલા દ્વિસંગી સંયોજનોએ મોટા પાયે લાગુ કરવામાં આવે ત્યારે એડીસ એજીપ્ટી સામે સિનર્જિસ્ટિક લાર્વિસાઇડલ અસરો પણ દર્શાવી (કોષ્ટક 6).
પુખ્ત વયના એડીસ એજીપ્ટીની મોટી વસ્તીને નિયંત્રિત કરવા માટે એડલ્ટોસાઇડલ બાયોએસે માટે ત્રણ સિનર્જિસ્ટિક સંયોજનો પસંદ કરવામાં આવ્યા હતા. મોટી જંતુ વસાહતો પર પરીક્ષણ કરવા માટે સંયોજનો પસંદ કરવા માટે, અમે પહેલા બે શ્રેષ્ઠ સિનર્જિસ્ટિક ટેર્પીન સંયોજનો પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કર્યું, એટલે કે કાર્વોન વત્તા લિમોનીન અને યુકેલિપ્ટોલ વત્તા યુડેસ્મોલ. બીજું, કૃત્રિમ ઓર્ગેનોફોસ્ફેટ મેલાથિઓન અને ટેર્પેનોઇડ્સના સંયોજનમાંથી શ્રેષ્ઠ સિનર્જિસ્ટિક સંયોજન પસંદ કરવામાં આવ્યું હતું. અમે માનીએ છીએ કે મેલાથિઓન અને યુડેસ્મોલનું સંયોજન મોટા જંતુ વસાહતો પર પરીક્ષણ માટે શ્રેષ્ઠ સંયોજન છે કારણ કે સૌથી વધુ અવલોકન કરાયેલ મૃત્યુદર અને ઉમેદવાર ઘટકોના ખૂબ ઓછા LC50 મૂલ્યો છે. મેલાથિઓન α-પિનેન, ડાયલીલ ડિસલ્ફાઇડ, યુકેલિપ્ટસ, કાર્વોન અને યુડેસ્મોલ સાથે સંયોજનમાં સિનર્જિઝમ દર્શાવે છે. પરંતુ જો આપણે LC50 મૂલ્યો જોઈએ, તો યુડેસ્મોલનું મૂલ્ય સૌથી ઓછું (2.25 ppm) છે. મેલાથિઓન, α-પિનેન, ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ, યુકેલિપ્ટોલ અને કાર્વોનના ગણતરી કરેલ LC50 મૂલ્યો અનુક્રમે 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 અને 140.79 ppm હતા. આ મૂલ્યો દર્શાવે છે કે મેલાથિઓન અને યુડેસ્મોલનું મિશ્રણ ડોઝની દ્રષ્ટિએ શ્રેષ્ઠ સંયોજન છે. પરિણામો દર્શાવે છે કે કાર્વોન વત્તા લિમોનીન અને યુડેસ્મોલ વત્તા મેલાથિઓનના સંયોજનોમાં 100% મૃત્યુદર જોવા મળ્યો હતો, જ્યારે અપેક્ષિત મૃત્યુદર 61% થી 65% હતો. અન્ય સંયોજન, યુડેસ્મોલ વત્તા યુકેલિપ્ટોલ, 24 કલાકના સંપર્ક પછી મૃત્યુદર 78.66% દર્શાવે છે, જે અપેક્ષિત મૃત્યુદર 60% છે. ત્રણેય પસંદ કરેલા સંયોજનોએ પુખ્ત વયના એડીસ એજીપ્ટી સામે મોટા પાયે લાગુ કરવામાં આવે ત્યારે પણ સિનર્જિસ્ટિક અસરો દર્શાવી હતી (કોષ્ટક 6).
આ અભ્યાસમાં, પસંદ કરેલા છોડ EOs જેમ કે Mp, As, Os, Em અને Cl એ એડીસ એજીપ્ટીના લાર્વા અને પુખ્ત તબક્કાઓ પર આશાસ્પદ ઘાતક અસરો દર્શાવી. Mp EO માં 0.42 ppm ના LC50 મૂલ્ય સાથે સૌથી વધુ લાર્વાશિક પ્રવૃત્તિ હતી, ત્યારબાદ As, Os અને Em EOs માં 24 કલાક પછી 50 ppm કરતા ઓછા LC50 મૂલ્ય સાથે આવે છે. આ પરિણામો મચ્છર અને અન્ય ડિપ્ટરસ માખીઓના અગાઉના અભ્યાસો સાથે સુસંગત છે10,11,12,13,14. જોકે Cl ની લાર્વાશિક શક્તિ અન્ય આવશ્યક તેલ કરતા ઓછી છે, 24 કલાક પછી LC50 મૂલ્ય 163.65 ppm સાથે, તેની પુખ્ત ક્ષમતા 24 કલાક પછી 23.37 ppm ના LC50 મૂલ્ય સાથે સૌથી વધુ છે. Mp, As અને Em EOs એ પણ 24 કલાકના સંપર્કમાં 100-120 ppm ની રેન્જમાં LC50 મૂલ્યો સાથે સારી એલર્જીક ક્ષમતા દર્શાવી હતી, પરંતુ તેમની લાર્વાશિક અસરકારકતા કરતા પ્રમાણમાં ઓછી હતી. બીજી બાજુ, EO Os એ સૌથી વધુ ઉપચારાત્મક માત્રામાં પણ નજીવી એલર્જીક અસર દર્શાવી હતી. આમ, પરિણામો સૂચવે છે કે છોડમાં ઇથિલિન ઓક્સાઇડની ઝેરીતા મચ્છરોના વિકાસના તબક્કાના આધારે બદલાઈ શકે છે15. તે જંતુના શરીરમાં EOs ના પ્રવેશ દર, ચોક્કસ લક્ષ્ય ઉત્સેચકો સાથેની તેમની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા અને દરેક વિકાસના તબક્કે મચ્છરની ડિટોક્સિફિકેશન ક્ષમતા પર પણ આધાર રાખે છે16. મોટી સંખ્યામાં અભ્યાસોએ દર્શાવ્યું છે કે મુખ્ય ઘટક સંયોજન ઇથિલિન ઓક્સાઇડની જૈવિક પ્રવૃત્તિમાં એક મહત્વપૂર્ણ પરિબળ છે, કારણ કે તે કુલ સંયોજનોનો મોટાભાગનો હિસ્સો ધરાવે છે3,12,17,18. તેથી, અમે દરેક EO માં બે મુખ્ય સંયોજનો ધ્યાનમાં લીધા. GC-MS પરિણામોના આધારે, ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ અને ડાયલિલ ટ્રાયસલ્ફાઇડને EO As ના મુખ્ય સંયોજનો તરીકે ઓળખવામાં આવ્યા હતા, જે અગાઉના અહેવાલો સાથે સુસંગત છે19,20,21. જોકે અગાઉના અહેવાલો દર્શાવે છે કે મેન્થોલ તેના મુખ્ય સંયોજનોમાંનું એક હતું, કાર્વોન અને લિમોનેનને ફરીથી Mp EO22,23 ના મુખ્ય સંયોજનો તરીકે ઓળખવામાં આવ્યા હતા. Os EO ની રચના પ્રોફાઇલ દર્શાવે છે કે યુજેનોલ અને મિથાઈલ યુજેનોલ મુખ્ય સંયોજનો છે, જે અગાઉના સંશોધકોના તારણો સમાન છે16,24. Eucalyptol અને eucalyptol ને Em પાંદડાના તેલમાં હાજર મુખ્ય સંયોજનો તરીકે નોંધવામાં આવ્યા છે, જે કેટલાક સંશોધકોના તારણો સાથે સુસંગત છે25,26 પરંતુ Olalade et al.27 ના તારણોથી વિપરીત છે. મેલેલ્યુકા આવશ્યક તેલમાં સિનેઓલ અને α-પિનેનનું પ્રભુત્વ જોવા મળ્યું હતું, જે અગાઉના અભ્યાસો જેવું જ છે28,29. વિવિધ સ્થળોએ એક જ છોડની પ્રજાતિમાંથી કાઢવામાં આવેલા આવશ્યક તેલની રચના અને સાંદ્રતામાં આંતરવિશિષ્ટ તફાવતો નોંધાયા છે અને આ અભ્યાસમાં પણ જોવા મળ્યા છે, જે ભૌગોલિક છોડની વૃદ્ધિની સ્થિતિ, લણણીનો સમય, વિકાસનો તબક્કો અથવા છોડની ઉંમરથી પ્રભાવિત છે. કીમોટાઇપ્સનો દેખાવ, વગેરે.22,30,31,32. ત્યારબાદ મુખ્ય ઓળખાયેલા સંયોજનો ખરીદવામાં આવ્યા હતા અને પુખ્ત એડીસ એજીપ્તી મચ્છરો પર તેમની લાર્વિસાઇડલ અસરો અને અસરો માટે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. પરિણામો દર્શાવે છે કે ડાયલીલ ડાયસલ્ફાઇડની લાર્વિસાઇડલ પ્રવૃત્તિ ક્રૂડ EO As ની તુલનામાં તુલનાત્મક હતી. પરંતુ ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડની પ્રવૃત્તિ EO As કરતા વધારે છે. આ પરિણામો કિમ્બરિસ એટ અલ. 33 દ્વારા ક્યુલેક્સ ફિલિપાઇન્સ પર મેળવેલા પરિણામો જેવા જ છે. જો કે, આ બે સંયોજનોએ લક્ષ્ય મચ્છરો સામે સારી ઓટોસાઇડલ પ્રવૃત્તિ દર્શાવી નથી, જે ટેનેબ્રિઓ મોલિટર પર પ્લાટા-રુએડા એટ અલ 34 ના પરિણામો સાથે સુસંગત છે. Os EO એડીસ એજીપ્તીના લાર્વા સ્ટેજ સામે અસરકારક છે, પરંતુ પુખ્ત સ્ટેજ સામે નહીં. એવું સ્થાપિત થયું છે કે મુખ્ય વ્યક્તિગત સંયોજનોની લાર્વિસાઇડલ પ્રવૃત્તિ ક્રૂડ ઓએસ ઇઓ કરતા ઓછી છે. આ અન્ય સંયોજનો અને ક્રૂડ ઇથિલિન ઓક્સાઇડમાં તેમની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ માટે ભૂમિકા સૂચવે છે. એકલા મિથાઇલ યુજેનોલમાં નહિવત્ પ્રવૃત્તિ હોય છે, જ્યારે એકલા યુજેનોલમાં મધ્યમ લાર્વિસાઇડલ પ્રવૃત્તિ હોય છે. આ નિષ્કર્ષ એક તરફ, 35,36 ની પુષ્ટિ કરે છે, અને બીજી તરફ, અગાઉના સંશોધકોના નિષ્કર્ષનો વિરોધાભાસ કરે છે37,38. યુજેનોલ અને મિથાઇલ્યુજેનોલના કાર્યાત્મક જૂથોમાં તફાવતો સમાન લક્ષ્ય જંતુ માટે વિવિધ ઝેરી અસરમાં પરિણમી શકે છે39. લિમોનેનમાં મધ્યમ લાર્વિસાઇડલ પ્રવૃત્તિ હોવાનું જાણવા મળ્યું હતું, જ્યારે કાર્વોનની અસર નજીવી હતી. તેવી જ રીતે, પુખ્ત જંતુઓ માટે લિમોનીનની પ્રમાણમાં ઓછી ઝેરીતા અને કાર્વોનની ઉચ્ચ ઝેરીતા કેટલાક અગાઉના અભ્યાસોના પરિણામોને સમર્થન આપે છે40 પરંતુ અન્યનો વિરોધાભાસ કરે છે41. ઇન્ટ્રાસાયક્લિક અને એક્સોસાયક્લિક બંને સ્થિતિઓ પર ડબલ બોન્ડની હાજરી લાર્વિસાઇડ્સ 3,41 તરીકે આ સંયોજનોના ફાયદામાં વધારો કરી શકે છે, જ્યારે કાર્વોન, જે અસંતૃપ્ત આલ્ફા અને બીટા કાર્બન સાથેનું કીટોન છે, પુખ્ત વયના લોકોમાં ઝેરી અસર માટે ઉચ્ચ સંભાવના દર્શાવે છે42. જોકે, લિમોનીન અને કાર્વોનની વ્યક્તિગત લાક્ષણિકતાઓ કુલ EO Mp (કોષ્ટક 1, કોષ્ટક 3) કરતા ઘણી ઓછી છે. પરીક્ષણ કરાયેલા ટેર્પેનોઇડ્સમાં, યુડેસ્મોલમાં 2.5 ppm ની નીચે LC50 મૂલ્ય સાથે સૌથી વધુ લાર્વિસાઇડલ અને પુખ્ત પ્રવૃત્તિ હોવાનું જાણવા મળ્યું, જે તેને એડીસ મચ્છરોના નિયંત્રણ માટે આશાસ્પદ સંયોજન બનાવે છે. તેનું પ્રદર્શન સમગ્ર EO Em કરતા સારું છે, જોકે આ ચેંગ એટ અલ.40 ના તારણો સાથે સુસંગત નથી. યુડેસ્મોલ એ બે આઇસોપ્રીન એકમો સાથેનું સેસ્ક્વીટરપીન છે જે નીલગિરી જેવા ઓક્સિજનયુક્ત મોનોટર્પીન્સ કરતાં ઓછું અસ્થિર છે અને તેથી જંતુનાશક તરીકે વધુ ક્ષમતા ધરાવે છે. નીલગિરી પોતે લાર્વિસાઇડલ પ્રવૃત્તિ કરતાં વધુ પુખ્ત પ્રવૃત્તિ ધરાવે છે, અને અગાઉના અભ્યાસોના પરિણામો આને સમર્થન અને રદિયો આપે છે37,43,44. એકલા પ્રવૃત્તિ લગભગ સમગ્ર EO Cl ની તુલનામાં તુલનાત્મક છે. અન્ય સાયકલિક મોનોટર્પીન, α-પિનેન, લાર્વિસાઇડલ અસર કરતાં એડીસ એજીપ્ટી પર ઓછી પુખ્ત અસર કરે છે, જે સંપૂર્ણ EO Cl ની અસરથી વિપરીત છે. ટેર્પેનોઇડ્સની એકંદર જંતુનાશક પ્રવૃત્તિ તેમની લિપોફિલિસિટી, અસ્થિરતા, કાર્બન શાખા, પ્રક્ષેપણ ક્ષેત્ર, સપાટી ક્ષેત્ર, કાર્યાત્મક જૂથો અને તેમની સ્થિતિઓ દ્વારા પ્રભાવિત થાય છે45,46. આ સંયોજનો કોષ સંચયનો નાશ કરીને, શ્વસન પ્રવૃત્તિને અવરોધિત કરીને, ચેતા આવેગના પ્રસારણને અવરોધિત કરીને, વગેરે દ્વારા કાર્ય કરી શકે છે. 47 કૃત્રિમ ઓર્ગેનોફોસ્ફેટ ટેમેફોસમાં 0.43 ppm ના LC50 મૂલ્ય સાથે સૌથી વધુ લાર્વિસાઇડલ પ્રવૃત્તિ હોવાનું જાણવા મળ્યું, જે લેકના ડેટા -Utala48 સાથે સુસંગત છે. કૃત્રિમ ઓર્ગેનોફોસ્ફરસ મેલાથિઓનની પુખ્ત પ્રવૃત્તિ 5.44 પીપીએમ નોંધાઈ હતી. જોકે આ બે ઓર્ગેનોફોસ્ફેટ્સે એડીસ એજીપ્ટીના પ્રયોગશાળા જાતો સામે અનુકૂળ પ્રતિભાવ દર્શાવ્યા છે, વિશ્વના વિવિધ ભાગોમાં આ સંયોજનો સામે મચ્છર પ્રતિકાર નોંધાયો છે49. જોકે, હર્બલ દવાઓ સામે પ્રતિકાર વિકાસના કોઈ સમાન અહેવાલો મળ્યા નથી50. આમ, વેક્ટર નિયંત્રણ કાર્યક્રમોમાં વનસ્પતિશાસ્ત્રને રાસાયણિક જંતુનાશકોના સંભવિત વિકલ્પો તરીકે ગણવામાં આવે છે.
થાઇમેટફોસ સાથે શક્તિશાળી ટેર્પેનોઇડ્સ અને ટેર્પેનોઇડ્સમાંથી તૈયાર કરાયેલા 28 દ્વિસંગી સંયોજનો (1:1) પર લાર્વિસાઇડલ અસરનું પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું, અને 9 સંયોજનો સિનર્જિસ્ટિક, 14 વિરોધી અને 5 વિરોધી હોવાનું જાણવા મળ્યું હતું. કોઈ અસર થઈ ન હતી. બીજી બાજુ, પુખ્ત વયના લોકો પર્ટેન્સી બાયોએસેમાં, 7 સંયોજનો સિનર્જિસ્ટિક, 15 સંયોજનો એન્ટિગોનિસ્ટિક અને 6 સંયોજનો કોઈ અસર ન હોવાનું જાણવા મળ્યું હતું. ચોક્કસ સંયોજનો સિનર્જિસ્ટિક અસર ઉત્પન્ન કરે છે તેનું કારણ વિવિધ મહત્વપૂર્ણ માર્ગોમાં વારાફરતી ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરતા ઉમેદવાર સંયોજનો અથવા ચોક્કસ જૈવિક માર્ગના વિવિધ મુખ્ય ઉત્સેચકોના ક્રમિક અવરોધને કારણે હોઈ શકે છે. ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ, યુકેલિપ્ટિસ અથવા યુજેનોલ સાથે લિમોનીનનું સંયોજન નાના અને મોટા બંને પ્રકારના ઉપયોગોમાં સિનર્જિસ્ટિક હોવાનું જાણવા મળ્યું હતું (કોષ્ટક 6), જ્યારે નીલગિરી અથવા α-પિનેન સાથે તેનું સંયોજન લાર્વા પર વિરોધી અસરો હોવાનું જાણવા મળ્યું હતું. સરેરાશ, લિમોનીન એક સારો સિનર્જિસ્ટ દેખાય છે, સંભવતઃ મિથાઈલ જૂથોની હાજરી, સ્ટ્રેટમ કોર્નિયમમાં સારી ઘૂંસપેંઠ અને ક્રિયાની અલગ પદ્ધતિને કારણે52,53. અગાઉ એવું નોંધાયું છે કે લિમોનીન જંતુના ક્યુટિકલ્સમાં પ્રવેશ કરીને (સંપર્ક ઝેરીતા), પાચનતંત્ર (એન્ટીફીડન્ટ) ને અસર કરીને અથવા શ્વસનતંત્ર (ધૂમ્રપાન પ્રવૃત્તિ) ને અસર કરીને ઝેરી અસરો પેદા કરી શકે છે, 54 જ્યારે યુજેનોલ જેવા ફિનાઇલપ્રોપેનોઇડ્સ મેટાબોલિક ઉત્સેચકો 55 ને અસર કરી શકે છે. તેથી, ક્રિયાના વિવિધ મિકેનિઝમ્સ સાથે સંયોજનોના સંયોજનો મિશ્રણની એકંદર ઘાતક અસરમાં વધારો કરી શકે છે. નીલગિરી ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ, નીલગિરી અથવા α-પિનેન સાથે સિનર્જિસ્ટિક હોવાનું જાણવા મળ્યું હતું, પરંતુ અન્ય સંયોજનો સાથેના અન્ય સંયોજનો કાં તો બિન-લાર્વિસાઇડલ અથવા વિરોધી હતા. પ્રારંભિક અભ્યાસો દર્શાવે છે કે નીલગિરી એસિટિલકોલિનેસ્ટેરેઝ (AChE), તેમજ ઓક્ટામાઇન અને GABA રીસેપ્ટર્સ56 પર અવરોધક પ્રવૃત્તિ ધરાવે છે. ચક્રીય મોનોટર્પીન્સ, યુકેલિપ્ટોલ, યુજેનોલ, વગેરેમાં તેમની ન્યુરોટોક્સિક પ્રવૃત્તિ જેવી જ ક્રિયા કરવાની પદ્ધતિ હોઈ શકે છે, 57 જેના કારણે પરસ્પર અવરોધ દ્વારા તેમની સંયુક્ત અસરો ઓછી થાય છે. તેવી જ રીતે, ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ, α-પિનેન અને લિમોનીન સાથે ટેમેફોસનું સંયોજન સિનર્જિસ્ટિક હોવાનું જણાયું હતું, જે હર્બલ ઉત્પાદનો અને કૃત્રિમ ઓર્ગેનોફોસ્ફેટ્સ વચ્ચે સિનર્જિસ્ટિક અસરના અગાઉના અહેવાલોને સમર્થન આપે છે58.
યુડેસ્મોલ અને નીલગિરીનું મિશ્રણ એડીસ એજીપ્ટીના લાર્વા અને પુખ્ત તબક્કાઓ પર સહઅનુભવી અસર કરતું હોવાનું જણાયું હતું, કદાચ તેમની વિવિધ રાસાયણિક રચનાઓને કારણે તેમની ક્રિયા કરવાની વિવિધ પદ્ધતિઓને કારણે. યુડેસ્મોલ (એક સેસ્ક્વીટરપીન) શ્વસનતંત્ર 59 ને અસર કરી શકે છે અને યુકેલિપ્ટોલ (એક મોનોટેરપીન) એસિટિલકોલિનેસ્ટેરેઝ 60 ને અસર કરી શકે છે. બે અથવા વધુ લક્ષ્ય સ્થળોએ ઘટકોનો સહ-સંપર્ક સંયોજનની એકંદર ઘાતક અસરને વધારી શકે છે. પુખ્ત પદાર્થોના બાયોએસેમાં, મેલાથિઓન કાર્વોન અથવા નીલગિરી અથવા યુકેલિપ્ટોલ અથવા ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ અથવા α-પિનેન સાથે સહઅનુભવી હોવાનું જણાયું હતું, જે દર્શાવે છે કે તે લિમોનીન અને ડાયના ઉમેરા સાથે સહઅનુભવી છે. એલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડના અપવાદ સિવાય, ટેર્પીન સંયોજનોના સમગ્ર પોર્ટફોલિયો માટે સારા સહઅનુભવી એલરસાઇડ ઉમેદવારો. થંગમ અને કેથિરેસન61 એ પણ હર્બલ અર્ક સાથે મેલાથિઓનની સહઅનુભવી અસરના સમાન પરિણામોની જાણ કરી. આ સહિયાર પ્રતિભાવ જંતુના ડિટોક્સિફાઇંગ ઉત્સેચકો પર મેલાથિઓન અને ફાયટોકેમિકલ્સની સંયુક્ત ઝેરી અસરોને કારણે હોઈ શકે છે. મેલાથિઓન જેવા ઓર્ગેનોફોસ્ફેટ્સ સામાન્ય રીતે સાયટોક્રોમ P450 એસ્ટેરેસીસ અને મોનોઓક્સિજેનેસીસ62,63,64 ને અટકાવીને કાર્ય કરે છે. તેથી, મેલાથિઓનને ક્રિયાના આ મિકેનિઝમ્સ સાથે અને ટેર્પેન્સને ક્રિયાના વિવિધ મિકેનિઝમ્સ સાથે જોડવાથી મચ્છરો પર એકંદર ઘાતક અસર વધી શકે છે.
બીજી બાજુ, વિરોધીતા સૂચવે છે કે પસંદ કરેલા સંયોજનો દરેક સંયોજન કરતાં સંયોજનમાં ઓછા સક્રિય હોય છે. કેટલાક સંયોજનોમાં વિરોધીતાનું કારણ એ હોઈ શકે છે કે એક સંયોજન શોષણ, વિતરણ, ચયાપચય અથવા ઉત્સર્જનના દરમાં ફેરફાર કરીને બીજા સંયોજનના વર્તનમાં ફેરફાર કરે છે. શરૂઆતના સંશોધકોએ આને દવા સંયોજનોમાં વિરોધીતાનું કારણ માન્યું હતું. પરમાણુઓ શક્ય પદ્ધતિ 65. તેવી જ રીતે, વિરોધીતાના સંભવિત કારણો ક્રિયાના સમાન મિકેનિઝમ્સ, સમાન રીસેપ્ટર અથવા લક્ષ્ય સ્થળ માટે ઘટક સંયોજનોની સ્પર્ધા સાથે સંબંધિત હોઈ શકે છે. કેટલાક કિસ્સાઓમાં, લક્ષ્ય પ્રોટીનનું બિન-સ્પર્ધાત્મક અવરોધ પણ થઈ શકે છે. આ અભ્યાસમાં, બે ઓર્ગેનોસલ્ફર સંયોજનો, ડાયલીલ ડાયસલ્ફાઇડ અને ડાયલીલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ, એ વિરોધી અસરો દર્શાવી, સંભવતઃ સમાન લક્ષ્ય સ્થળ માટે સ્પર્ધાને કારણે. તેવી જ રીતે, આ બે સલ્ફર સંયોજનોએ વિરોધી અસરો દર્શાવી અને યુડેસ્મોલ અને α-પિનેન સાથે જોડવામાં આવે ત્યારે કોઈ અસર થઈ નહીં. યુડેસ્મોલ અને આલ્ફા-પિનેન પ્રકૃતિમાં ચક્રીય છે, જ્યારે ડાયલિલ ડાયસલ્ફાઇડ અને ડાયલિલ ટ્રાયસલ્ફાઇડ પ્રકૃતિમાં એલિફેટિક છે. રાસાયણિક બંધારણના આધારે, આ સંયોજનોના સંયોજનથી એકંદર ઘાતક પ્રવૃત્તિમાં વધારો થવો જોઈએ કારણ કે તેમના લક્ષ્ય સ્થાનો સામાન્ય રીતે અલગ અલગ હોય છે34,47, પરંતુ પ્રાયોગિક રીતે અમને વિરોધીતા જોવા મળી, જે ક્રિયાપ્રતિક્રિયાના પરિણામે કેટલાક અજાણ્યા જીવોમાં આ સંયોજનોની ભૂમિકાને કારણે હોઈ શકે છે. તેવી જ રીતે, સિનેઓલ અને α-પિનેનના સંયોજનથી વિરોધી પ્રતિભાવો ઉત્પન્ન થયા, જોકે સંશોધકોએ અગાઉ અહેવાલ આપ્યો હતો કે બે સંયોજનો ક્રિયાના અલગ લક્ષ્યો ધરાવે છે47,60. બંને સંયોજનો ચક્રીય મોનોટર્પેન્સ હોવાથી, કેટલાક સામાન્ય લક્ષ્ય સ્થાનો હોઈ શકે છે જે બંધન માટે સ્પર્ધા કરી શકે છે અને અભ્યાસ કરાયેલ સંયુક્ત જોડીઓની એકંદર ઝેરીતાને પ્રભાવિત કરી શકે છે.
LC50 મૂલ્યો અને અવલોકન કરાયેલ મૃત્યુદરના આધારે, બે શ્રેષ્ઠ સિનર્જિસ્ટિક ટેર્પીન સંયોજનો પસંદ કરવામાં આવ્યા હતા, એટલે કે કાર્વોન + લિમોનીન અને યુકેલિપ્ટોલ + યુડેસ્મોલ, તેમજ ટેર્પેન્સ સાથે કૃત્રિમ ઓર્ગેનોફોસ્ફરસ મેલાથિઓન. પુખ્ત જંતુનાશક બાયોએસેમાં મેલાથિઓન + યુડેસ્મોલ સંયોજનોના શ્રેષ્ઠ સિનર્જિસ્ટિક સંયોજનનું પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. મોટા જંતુ વસાહતોને લક્ષ્ય બનાવો જેથી ખાતરી થાય કે આ અસરકારક સંયોજનો પ્રમાણમાં મોટા સંપર્ક સ્થાનો પર મોટી સંખ્યામાં વ્યક્તિઓ સામે કામ કરી શકે છે કે નહીં. આ બધા સંયોજનો જંતુઓના મોટા ટોળા સામે સિનર્જિસ્ટિક અસર દર્શાવે છે. એડીસ એજીપ્તી લાર્વાની મોટી વસ્તી સામે પરીક્ષણ કરાયેલ શ્રેષ્ઠ સિનર્જિસ્ટિક લાર્વીસાઇડલ સંયોજન માટે સમાન પરિણામો પ્રાપ્ત થયા હતા. આમ, એવું કહી શકાય કે છોડના EO સંયોજનોનું અસરકારક સિનર્જિસ્ટિક લાર્વીસાઇડલ અને પુખ્તવયના સંયોજન હાલના કૃત્રિમ રસાયણો સામે મજબૂત ઉમેદવાર છે અને તેનો ઉપયોગ એડીસ એજીપ્તી વસ્તીને નિયંત્રિત કરવા માટે વધુ થઈ શકે છે. તેવી જ રીતે, મચ્છરોને આપવામાં આવતા થાઇમેટફોસ અથવા મેલાથિઓનના ડોઝ ઘટાડવા માટે કૃત્રિમ લાર્વિસાઇડ્સ અથવા એડલ્ટિસાઇડ્સ અને ટેર્પેન્સના અસરકારક સંયોજનોનો ઉપયોગ પણ કરી શકાય છે. આ શક્તિશાળી સિનર્જિસ્ટિક સંયોજનો એડીસ મચ્છરોમાં ડ્રગ પ્રતિકારના ઉત્ક્રાંતિ પર ભવિષ્યના અભ્યાસો માટે ઉકેલો પૂરા પાડી શકે છે.
એડીસ ઇજિપ્તીના ઇંડા ડિબ્રુગઢના પ્રાદેશિક તબીબી સંશોધન કેન્દ્ર, ઇન્ડિયન કાઉન્સિલ ઓફ મેડિકલ રિસર્ચમાંથી એકત્રિત કરવામાં આવ્યા હતા અને ગૌહાટી યુનિવર્સિટીના પ્રાણીશાસ્ત્ર વિભાગમાં નિયંત્રિત તાપમાન (28 ± 1 °C) અને ભેજ (85 ± 5%) હેઠળ નીચેની પરિસ્થિતિઓમાં રાખવામાં આવ્યા હતા: અરિવોલી વગેરેનું વર્ણન કરવામાં આવ્યું હતું. ઇંડામાંથી બહાર નીકળ્યા પછી, લાર્વાને લાર્વા ખોરાક (કૂતરાના બિસ્કિટ પાવડર અને યીસ્ટ 3:1 ગુણોત્તરમાં) આપવામાં આવ્યો હતો અને પુખ્ત વયના લોકોને 10% ગ્લુકોઝ દ્રાવણ આપવામાં આવ્યું હતું. બહાર નીકળ્યા પછી ત્રીજા દિવસથી, પુખ્ત માદા મચ્છરોને આલ્બિનો ઉંદરોનું લોહી ચૂસવાની મંજૂરી આપવામાં આવી હતી. ફિલ્ટર પેપરને ગ્લાસ પાણીમાં પલાળી રાખો અને તેને ઇંડા મૂકતા પાંજરામાં મૂકો.
પસંદ કરેલા છોડના નમૂનાઓ જેમ કે નીલગિરી પાંદડા (Myrtaceae), પવિત્ર તુલસી (Lamiaceae), ફુદીનો (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) અને allium bulbs (Amaryllidaceae). ગુવાહાટીથી એકત્રિત કરવામાં આવ્યા અને ગૌહાટી યુનિવર્સિટીના વનસ્પતિશાસ્ત્ર વિભાગ દ્વારા ઓળખવામાં આવ્યા. એકત્રિત છોડના નમૂનાઓ (500 ગ્રામ) ને 6 કલાક માટે ક્લેવેન્જર ઉપકરણનો ઉપયોગ કરીને હાઇડ્રોડિસ્ટિલેશન કરવામાં આવ્યું. કાઢેલા EO ને સ્વચ્છ કાચની શીશીઓમાં એકત્રિત કરવામાં આવ્યા અને વધુ અભ્યાસ માટે 4°C પર સંગ્રહિત કરવામાં આવ્યા.
લાર્વિસાઇડલ ટોક્સિસિટીનો અભ્યાસ થોડા સુધારેલા પ્રમાણભૂત વિશ્વ આરોગ્ય સંગઠન પ્રક્રિયાઓ 67 નો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવ્યો હતો. DMSO ને ઇમલ્સિફાયર તરીકે ઉપયોગ કરો. શરૂઆતમાં દરેક EO સાંદ્રતાનું પરીક્ષણ 100 અને 1000 ppm પર કરવામાં આવ્યું હતું, જેમાં દરેક પ્રતિકૃતિમાં 20 લાર્વા બહાર આવ્યા હતા. પરિણામોના આધારે, એકાગ્રતા શ્રેણી લાગુ કરવામાં આવી હતી અને 1 કલાકથી 6 કલાક (1 કલાકના અંતરાલ પર) અને સારવાર પછી 24 કલાક, 48 કલાક અને 72 કલાક પછી મૃત્યુદર રેકોર્ડ કરવામાં આવ્યો હતો. 24, 48 અને 72 કલાકના સંપર્ક પછી સબલેથલ સાંદ્રતા (LC50) નક્કી કરવામાં આવી હતી. દરેક સાંદ્રતાનું પરીક્ષણ એક નકારાત્મક નિયંત્રણ (માત્ર પાણી) અને એક હકારાત્મક નિયંત્રણ (DMSO-સારવાર કરાયેલ પાણી) સાથે ત્રિપુટીમાં કરવામાં આવ્યું હતું. જો પ્યુપેશન થાય છે અને નિયંત્રણ જૂથના 10% થી વધુ લાર્વા મૃત્યુ પામે છે, તો પ્રયોગ પુનરાવર્તિત થાય છે. જો નિયંત્રણ જૂથમાં મૃત્યુ દર 5-10% ની વચ્ચે હોય, તો એબોટ કરેક્શન ફોર્મ્યુલા 68 નો ઉપયોગ કરો.
રામર એટ અલ. 69 દ્વારા વર્ણવેલ પદ્ધતિનો ઉપયોગ એસીટોનનો દ્રાવક તરીકે ઉપયોગ કરીને એડીસ એજીપ્તી સામે પુખ્ત વયના લોકો માટે બાયોએસે માટે કરવામાં આવ્યો હતો. શરૂઆતમાં દરેક EOનું 100 અને 1000 ppm ની સાંદ્રતા પર પુખ્ત એડીસ એજીપ્તી મચ્છરો સામે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. વોટમેન નંબર પર દરેક તૈયાર દ્રાવણના 2 મિલી દ્રાવણનો ઉપયોગ કરો. ફિલ્ટર પેપરનો 1 ટુકડો (કદ 12 x 15 cm2) અને એસીટોનને 10 મિનિટ માટે બાષ્પીભવન થવા દો. નિયંત્રણ તરીકે ફક્ત 2 મિલી એસીટોન સાથે સારવાર કરાયેલ ફિલ્ટર પેપરનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. એસીટોન બાષ્પીભવન થયા પછી, સારવાર કરાયેલ ફિલ્ટર પેપર અને નિયંત્રણ ફિલ્ટર પેપરને નળાકાર ટ્યુબ (10 સેમી ઊંડા) માં મૂકવામાં આવે છે. 3 થી 4 દિવસના દસ બિન-લોહી પીનારા મચ્છરોને દરેક સાંદ્રતાના ત્રિપુટીમાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવ્યા હતા. પ્રારંભિક પરીક્ષણોના પરિણામોના આધારે, પસંદ કરેલા તેલની વિવિધ સાંદ્રતાનું પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. મચ્છર છોડ્યા પછી 1 કલાક, 2 કલાક, 3 કલાક, 4 કલાક, 5 કલાક, 6 કલાક, 24 કલાક, 48 કલાક અને 72 કલાકમાં મૃત્યુદર નોંધવામાં આવ્યો હતો. 24 કલાક, 48 કલાક અને 72 કલાકના સંપર્ક સમય માટે LC50 મૂલ્યોની ગણતરી કરો. જો નિયંત્રણ લોટનો મૃત્યુદર 20% થી વધુ હોય, તો સમગ્ર પરીક્ષણનું પુનરાવર્તન કરો. તેવી જ રીતે, જો નિયંત્રણ જૂથમાં મૃત્યુદર 5% થી વધુ હોય, તો એબોટના સૂત્ર 68 નો ઉપયોગ કરીને સારવાર કરાયેલા નમૂનાઓ માટે પરિણામોને સમાયોજિત કરો.
પસંદ કરેલા આવશ્યક તેલના ઘટક સંયોજનોનું વિશ્લેષણ કરવા માટે ગેસ ક્રોમેટોગ્રાફી (એજિલેન્ટ 7890A) અને માસ સ્પેક્ટ્રોમેટ્રી (Accu TOF GCv, Jeol) કરવામાં આવી હતી. GC એક FID ડિટેક્ટર અને કેશિકા સ્તંભ (HP5-MS) થી સજ્જ હતું. વાહક ગેસ હિલીયમ હતો, પ્રવાહ દર 1 મિલી/મિનિટ હતો. GC પ્રોગ્રામ Allium sativum ને 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M અને Ocimum Saintum ને 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, મિન્ટ 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, નીલગિરી 20.60-1M-10-200-3M-30-280 માટે સેટ કરે છે, અને લાલ માટે એક હજાર સ્તરો માટે તેઓ 10:60-1M-8-220-5M-8-270-3M છે.
દરેક EO ના મુખ્ય સંયોજનો GC ક્રોમેટોગ્રામ અને માસ સ્પેક્ટ્રોમેટ્રી પરિણામો (NIST 70 સ્ટાન્ડર્ડ્સ ડેટાબેઝનો સંદર્ભ) માંથી ગણતરી કરાયેલ ક્ષેત્રફળ ટકાવારીના આધારે ઓળખવામાં આવ્યા હતા.
દરેક EO માં બે મુખ્ય સંયોજનો GC-MS પરિણામોના આધારે પસંદ કરવામાં આવ્યા હતા અને વધુ બાયોએસે માટે સિગ્મા-એલ્ડ્રિચ પાસેથી 98-99% શુદ્ધતા પર ખરીદવામાં આવ્યા હતા. ઉપરોક્ત વર્ણવ્યા મુજબ એડીસ એજિપ્ટી સામે લાર્વિસાઇડલ અને પુખ્ત અસરકારકતા માટે સંયોજનોનું પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતા કૃત્રિમ લાર્વિસાઇડ્સ ટેમફોસેટ (સિગ્મા એલ્ડ્રિચ) અને પુખ્ત વયના લોકો માટે દવા મેલાથિઓન (સિગ્મા એલ્ડ્રિચ) નું વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું જેથી પસંદ કરેલા EO સંયોજનો સાથે તેમની અસરકારકતાની તુલના કરી શકાય, સમાન પ્રક્રિયાને અનુસરીને.
પસંદ કરેલા ટેર્પીન સંયોજનો અને ટેર્પીન સંયોજનો વત્તા વ્યાપારી ઓર્ગેનોફોસ્ફેટ્સ (ટાઇલફોસ અને મેલાથિઓન) ના દ્વિસંગી મિશ્રણો દરેક ઉમેદવાર સંયોજનના LC50 ડોઝને 1:1 ગુણોત્તરમાં ભેળવીને તૈયાર કરવામાં આવ્યા હતા. ઉપર વર્ણવ્યા મુજબ એડીસ એજીપ્ટીના લાર્વા અને પુખ્ત તબક્કાઓ પર તૈયાર કરેલા સંયોજનોનું પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. દરેક જૈવપરીક્ષણ દરેક સંયોજન માટે ત્રણ પ્રતિકૃતિમાં અને દરેક સંયોજનમાં હાજર વ્યક્તિગત સંયોજનો માટે ત્રણ પ્રતિકૃતિમાં કરવામાં આવ્યું હતું. 24 કલાક પછી લક્ષ્ય જંતુઓનું મૃત્યુ નોંધવામાં આવ્યું હતું. નીચેના સૂત્રનો ઉપયોગ કરીને દ્વિસંગી મિશ્રણ માટે અપેક્ષિત મૃત્યુદરની ગણતરી કરો.
જ્યાં E = દ્વિસંગી સંયોજન, એટલે કે જોડાણ (A + B) ના પ્રતિભાવમાં એડીસ એજીપ્તી મચ્છરોનો અપેક્ષિત મૃત્યુ દર.
પાવલા52 દ્વારા વર્ણવેલ પદ્ધતિ દ્વારા ગણતરી કરાયેલ χ2 મૂલ્યના આધારે દરેક દ્વિસંગી મિશ્રણની અસરને સિનર્જિસ્ટિક, વિરોધી અથવા કોઈ અસર નહીં તરીકે લેબલ કરવામાં આવી હતી. નીચેના સૂત્રનો ઉપયોગ કરીને દરેક સંયોજન માટે χ2 મૂલ્યની ગણતરી કરો.
જ્યારે ગણતરી કરેલ χ2 મૂલ્ય સ્વતંત્રતાની અનુરૂપ ડિગ્રી (95% કોન્ફિડન્સ અંતરાલ) માટે કોષ્ટક મૂલ્ય કરતા વધારે હોય અને જો અવલોકિત મૃત્યુદર અપેક્ષિત મૃત્યુદર કરતાં વધુ હોય તેવું જણાય ત્યારે સંયોજનની અસરને સિનર્જિસ્ટિક તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવી હતી. તેવી જ રીતે, જો કોઈપણ સંયોજન માટે ગણતરી કરેલ χ2 મૂલ્ય સ્વતંત્રતાની કેટલીક ડિગ્રી સાથે કોષ્ટક મૂલ્ય કરતાં વધુ હોય, પરંતુ અવલોકિત મૃત્યુદર અપેક્ષિત મૃત્યુદર કરતાં ઓછો હોય, તો સારવાર વિરોધી માનવામાં આવે છે. અને જો કોઈપણ સંયોજનમાં χ2 નું ગણતરી કરેલ મૂલ્ય સ્વતંત્રતાની અનુરૂપ ડિગ્રીમાં કોષ્ટક મૂલ્ય કરતા ઓછું હોય, તો સંયોજનનો કોઈ પ્રભાવ નથી તેવું માનવામાં આવે છે.
મોટી સંખ્યામાં જંતુઓ સામે પરીક્ષણ માટે ત્રણ થી ચાર સંભવિત સિનર્જિસ્ટિક સંયોજનો (100 લાર્વા અને 50 લાર્વાસાઇડલ અને પુખ્ત જંતુ પ્રવૃત્તિ) પસંદ કરવામાં આવ્યા હતા. પુખ્ત વયના લોકો ઉપર મુજબ આગળ વધે છે. મિશ્રણની સાથે, પસંદ કરેલા મિશ્રણોમાં હાજર વ્યક્તિગત સંયોજનોનું પણ સમાન સંખ્યામાં એડીસ એજિપ્તી લાર્વા અને પુખ્ત વયના લોકો પર પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. સંયોજન ગુણોત્તર એક ઉમેદવાર સંયોજનના એક ભાગ LC50 ડોઝ અને બીજા ઘટક સંયોજનના ભાગ LC50 ડોઝ છે. પુખ્ત વયના લોકો દ્વારા કરવામાં આવતી પ્રવૃત્તિ બાયોએસેમાં, પસંદ કરેલા સંયોજનોને દ્રાવક એસિટોનમાં ઓગાળવામાં આવ્યા હતા અને 1300 cm3 નળાકાર પ્લાસ્ટિક કન્ટેનરમાં લપેટીને ફિલ્ટર પેપર પર લાગુ કરવામાં આવ્યા હતા. એસીટોનને 10 મિનિટ માટે બાષ્પીભવન કરવામાં આવ્યું હતું અને પુખ્ત વયના લોકો મુક્ત થયા હતા. એ જ રીતે, લાર્વાસાઇડલ બાયોએસેમાં, LC50 ઉમેદવાર સંયોજનોના ડોઝને પહેલા DMSO ના સમાન જથ્થામાં ઓગાળવામાં આવ્યા હતા અને પછી 1300 cc પ્લાસ્ટિક કન્ટેનરમાં સંગ્રહિત 1 લિટર પાણીમાં ભેળવવામાં આવ્યા હતા, અને લાર્વા મુક્ત થયા હતા.
LC50 મૂલ્યોની ગણતરી કરવા માટે SPSS (સંસ્કરણ 16) અને મિનિટેબ સોફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને 71 રેકોર્ડ કરાયેલ મૃત્યુદર ડેટાનું સંભવિત વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું.